John Turturro nasceu no Brooklyn, Nova York, sendo filho da cantora de jazz Katherine Florence e do carpinteiro Nicholas Turturro. O ator ficou conhecido por seus papeis em O Grande Lebowski, Tratamento de Choque e Transformers. Turturro está escalado para interpretar o gângster Carmine Falcone, em The Batman, em 2022.
Turturro foi criado por seus pais na religião católica. Ele se formou em Artes Teatrais na State University of New York, em New Paltz, e completou seu MFA na Yale School of Drama.
Sua estreia nos cinemas se deu com um papel sem fala em Touro Indomável (1980), de Martin Scorsese, sendo, o filme, aclamado pela crítica. Em 1985, o ator participou de To Live and Die in L.A., de William Friedkin, contracenando com Willem Dafoe.
Três anos depois, Spike Lee o convidou para atuar em Faça a Coisa Certa (1988), após ter ficado encantado com o trabalho de Turturro em Five Corners (1987). O filme foi o primeiro de uma longa colaboração entre o diretor e o ator, que trabalharam conjuntamente em um total de nove filmes: Mais e Melhores Blues (1990), Febre da Selva (1991), Irmãos de Sangue (1995), Garota 6 (1996), Jogada Decisiva (1998), O Verão de Sam (1999), Elas Me Odeiam, Mas Me Querem (2004) e Milagre em Santa Anna (2008).
O ator também se envolveu em uma longa colaboração com os irmãos Coen. Ele apareceu em seus filmes: Ajuste Final (1990), Barton Fink - Delírios de Hollywood (1991), O Grande Lebowski (1998) e E Aí, Meu Irmão, Cadê Você? (2000).
Turturro produziu, dirigiu e também atuou no filme Illuminata (1999), estrelando sua esposa, a atriz Katherine Borowitz. Em 2006, ele apareceu em O Bom Pastor, de Robert De Niro, e como o agente Seymour Simmons, em quatro filmes da franquia Transformers. Em 2010, o ator digiriu o longa Passione e Rio, Eu Te Amo, em 2014.
Ele está escalado para viver o gângster Carmine Falcone, em The Batman, em 2022. O ator dividirá a tela com Robert Pattinson, Paul Dano, Colin Farell e Zoë Kravitz.